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细胞系名称: NCI-H292

细胞株编号: GYC238

中文名称: 人肺癌细胞(淋巴结转移)

种属: 人

培养基: RPMI-1640

形态: 上皮细胞样

生长方式: 贴壁生长

价格: 1800¥

NCI-H292(人肺癌细胞(淋巴结转移)购买价格:1800¥
NCI-H292(人肺癌细胞(淋巴结转移)购买说明书:
名称 NCI-H292(人肺癌细胞(淋巴结转移))(通过STR鉴定)
别称 H292; H-292; NCI-HUT-292; Hut292; NCIH292
种属
年龄(性别) 女;32岁
组织来源 肺粘膜上皮细胞癌;肺
生长特性 贴壁细胞
细胞形态 上皮细胞样
背景描述 NCI-H292细胞源自肺支气管黏液上皮样癌的淋巴结转移灶;先用成份限定的培养基分离得到,然后换成含血清的培养基培养。培养条件下,NCI-H292细胞保留了黏液上皮的特性,可从其超微结构的表现和多种鳞状上皮分化标记的表达而判断。NCI-H292细胞支持HBV的生长,左旋多巴脱羧酶阴性。NCI-H292细胞可以作为筛选模型,将人类亚基因组片段转染入细胞来研究HBV及其自身基因在病毒性肝炎和肝癌发生中的作用。NCI-H292细胞角蛋白、波形蛋白、黏液洋红染色阳线,但神经丝三联蛋白阴性。
生物安全等级 1
生长培养基 RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120)
推荐传代比例 1:3-1:4
推荐换液频率 2-3天/次
倍增时间 ~48 hours
冻存条件
冻存液:50%基础培养基+40%胎牛血清+10%DMSO
温度:液氮
培养条件
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice; tumors histologically resemble the original biopsy specimen and retain mucoepidermoid features.
基因表达情况 keratin; vimentin,The cells retain their mucoepidermoid characteristics in culture as determined by their ultrastructure and expression of multiple markers of squamous differentiation. TANK cells show reactivity with human alloantisera specific for t
保藏机构 ATCC; CRL-1848
NCI-H292(人肺癌细胞(淋巴结转移)购买生物技术研究:
苏复宁洗液对人肺癌细胞株N CI—H 292 的抑制作用研究
苏复宁洗液是基于我们新发现的一种抗癌有效成分巴西木素,针对膀胱癌术后高复发率而研制的中药制剂。与常用的化疗药物相比较,具有毒副作用小、安全高效的特点。近年来研究结果表明,巴西木素对多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用,本研究以人肺癌细胞株 N CI—H 292 为靶细胞,观察离体条件下苏复宁洗液在不同浓度下对靶细胞的抑制活性 .以探讨苏复宁洗液的抗肿瘤活性。(杨 芳 杨喜 花 陈丽 霞 杨永明)
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 细胞株:人肺癌细胞株 N CI.H 292 。山西省人民医院呼吸科李圣文惠赠
1|1.2 试剂及耗材 :R PM I1640 培养基购 自美国 Gibco 公司:胎牛血清购自杭州四季青生物工程材料有限公司;胰蛋白酶购自上海生工生物工程有限公司;四甲基偶氮唑蓝(M Y r)购自Solarbio 公司;二甲基亚砜(D M SO )购 自天津市富宇精细化工有限公司;96 孔细胞培养板购自加拿大 BBI公司。
1.1.3 药物:苏复宁洗液生产批号 20130518。
1.1. 4 仪器:生物安全柜:青岛海尔医用低温科技有限公司:C O 培养箱:美国 NuA ire 公司 N U 一5500E ;倒置显微镜 :德国Leiea 090—135.00 1;光学显微镜 :Et本 O lym pus C X 21FS 1;电子天平:日本岛津制作所 A TY 224 ;SunR ise 酶标仪 :奥地利Tecan 公司。
1.2 实验方法
1.2.1 实验分组:阴性对照组,无细胞的培养基调零组 ,对照组,苏复宁 8 个剂量组:20 、17、14.45、l2.28、10. 44、8.87、7.54 、6 .4 1 ~ g/m l。
1.2.2 细胞培养 :N CI.H 292 细胞培养于含 10%胎牛血清的R PM I1640 培养基中,置 37%、5%C O2及饱和湿度的恒温孵育箱中培养。取对数生长期的细胞 ,以 0.25%胰蛋白酶消化制成细胞悬液进行 实验 。
1.2_3 M T I"法检测 N C I.H 292 细胞抑制率:N C I—H 292 细胞以1.2x 104个/孑L接种于 96 孔板中,每孔加入培养基 100 Ixl,置于 37 ℃、5%CO 培养箱中培养。细胞贴壁后 ,除去原培养基,按上述分组方法加入含有不同浓度药物的培养基 100 V,1。阴性对照组加入等量的磷酸盐缓冲液(PBS)(设 lO 个复孔),并设立无细胞的培养基为调零组(设 lO个复孔),各药物组设 5个复孔。加药 24 h 后去除原培养基.每孔加入 100 /,1含 0.5m s/m 1 M T Y 的培养基继续培养 4 h。4 h 后去除孔内含 M T r的培养基 ,每孔加入 150 ILl DM SO ,置酶标仪低速振荡 10m in 使结晶物充分溶解,测定在 492 nm 波长下的吸光度(A值)。计算各浓度药物对 NCI.H 292 细胞的抑制率。抑制率(%)=(对照组平均 A 值一实验组平均A 值),对照组平均A 值~ 100~ 。lglC50=Xm —I [P一(3一Pm —Pn)/4](Xm :lg 最大剂量 ;I:lg(最大剂量,相邻剂量 );P :阳性反应率之和;Pm :最大阳性反应率;Pn:最小阳性反应率)
1.3 统计学处理
采用 SPSS 21.0 统计软件进行统计学分析,数据呈正态分布,采用单因素方差分析,方差齐采用 LSD .t检验 ,方差不齐采用 D unnett S 乃 检验。若数据呈非正态分布则采用非参数检验 ,P<O.05 为差异有统计学意义。
2结果
本实验中8个苏复宁浓度对NCI-H292细胞的抑制率在7.12%~71.70%,涵盖了IC50,设计较为成功,根据公式计算出IC50为12.52μg/ml。17μg/ml组对细胞抑制率最高,为71.70%,20μg/ml次之,为70.63%,6.41ug/ml组抑制率最低,为7.12%20μg/ml、17μg/ml、14.45ug/ml、12.28g/ml、10.44μg/ml与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);20μg/ml、17g/ml、14.45μg/ml、12.28μg/ml与6.41μg/ml相比差异有统计学意义(P<0.05);20μg/ml、17μg/ml组与10.44μg/ml、8.87g/ml、7.54g/ml组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)见表1n
3 讨  论
苏木为豆科小乔木或灌木,其味甘、咸、平 ,人心、肝 、脾经。其以干燥心材入药 ,具有活血祛瘀、消肿止痛等功效 ,收载于中华人民共和国药典一部。苏复宁洗液是从中药材苏木当中提取的一种抗癌有效成分一 巴西木素,采用冷冻纯化技术,将其制备成冻干粉。近年来的研究结果表明,巴西木素对多种肿瘤细胞均能产生显著的抑制作用,能诱导人卵巢癌细胞 SK OV 3 产生凋亡[4]。能显著抑制人类膀胱癌 T24 细胞的增殖],能通过抑制多发骨髓瘤U266细胞组蛋白脱乙酰激酶的活性而干扰细胞的周期并诱导细胞凋亡等,巴西木素是苏木中主要抗癌有效成分之一。本试验结果表明:苏复宁洗液20μg/ml、17ug/ml、14.45g/ml、12.28g/ml、10.44g/ml8.87gml、7.54gml,浓度组对人肺癌NCI-H292细胞抑制作用显著,且与空白对照组比较差异有统计学意义,尤其以苏复宁洗液17μg/ml组作用最为显著。从实验数据中我们看到整体实验设计浓度是成功的,并计算出IC50为12.52μg/ml,为之后的实验提供实验依据。
NCI-H292(人肺癌细胞(淋巴结转移)购买收到细胞后,请客户按照以下方法进行操作:
1、取出T25培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态;  
2、 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养; 
3、 细胞传代    
1)  吸出T25培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;  
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;  
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5ml,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;  
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。 
 注意事项  
1、 培养基于4℃条件下可保存3-6个月; 
2、 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;  
3、 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态;  
4、 该细胞只可用于科研。