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微生物实验室菌种传代流程

  菌种传代
<菌种传代>
  微生物实验室菌种的传代:只有经确认鉴定符合要求的菌种可以使用或用于传代。菌种应尽量避免不必要的接种和传代,菌株的传代次数不得超过 5 代,(从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代) 。
 
  1、菌种传代前应准备好适于该菌种生长的培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护的生物安全柜内进行。
                                      
  2、点燃酒精灯,在火焰上部操作,将原有的菌种斜面(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指及中指之间,菌种管在前,接种管在后,使试管内斜面向上,两支试管口平齐,应斜持试管呈45°角,以免管底凝集水浸湿培养基表面。用右手在火焰旁转动两支试管胶塞,以便接种时易于拨取。再用右手持接种环的柄端,垂直或稍斜地把接种环在火焰上灼烧。将接种环烧红约30s,随后将接种棒金属部分在火焰上烧灼,以彻底灭菌。用右手的小指和手掌之间以及无名指与小指之间,在火焰旁分别拔除两支试管的胶塞,持住。
 
  在将试管口在火焰上通过以杀灭管口的细菌,但勿烧的过热,将烧灼的接种环插入菌种管内,先接触无菌苔生长的培养基上,如有溶印则表明接种环未冷却,待冷后,再从斜面上挑取少许菌苔。取出时接种环不能通过火焰,应在火焰旁迅速插入接种管,在斜面上由下而上划 “Z”字型曲线,当接种完毕,立即将管口通过火焰灭菌,右手到火焰旁塞上胶塞,不要将管口离开火焰旁去迎接右手的胶塞。最后将接种环烧灼灭菌放置备用。
 
  将复活的菌种转接至固体或液体培养基中,适宜温度培养一定时间,此为第 1 代( F1) ,分离出单个纯种菌落。挑取 F1 单菌落,转接、培养得到第 2 代( F2) ,可以用做工作用菌种,同时可进行保藏。


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